Tris 醋酸盐电泳缓冲液配方
一、所需材料
1. **Tris 碱**：分析纯级别，用于提供缓冲体系的碱性成分。
2. **冰醋酸**：优级纯，作为酸性成分与 Tris 碱共同调节缓冲液的 pH 值。
3. **乙二胺四乙酸二钠（EDTA - Na₂）**：分析纯，主要作用是螯合溶液中的金属离子，防止其对实验过程可能产生的干扰。
4. **去离子水**：保证溶液的纯净度，避免杂质对实验的影响。

二、配制步骤
1. **准备合适的容器**：选取洁净且容积适宜的玻璃烧杯或塑料容器，用于配制缓冲液。
2. **称取 Tris 碱**：依据配方精确称取一定质量的 Tris 碱，放入准备好的容器中。例如，若需配制 1L 浓度为 0.05mol/L 的 Tris 醋酸盐电泳缓冲液，根据 Tris 碱的摩尔质量（121.14g/mol），计算得出应称取 Tris 碱质量为\(0.05mol/L×1L×121.14g/mol = 6.057g\) 。
3. **加入冰醋酸**：使用移液管准确量取适量冰醋酸加入容器。以配制上述 1L 缓冲液为例，假设需冰醋酸体积为\(V\) mL，根据缓冲液中醋酸的最终浓度及冰醋酸的密度（1.05g/mL）和纯度（一般为 99.5% - 100%）等参数，通过相关计算确定\(V\)值并量取加入。
4. **加入 EDTA - Na₂**：精确称取适量 EDTA - Na₂ 加入容器。例如，若要使缓冲液中 EDTA - Na₂ 浓度达到 0.001mol/L，根据其摩尔质量（372.24g/mol），计算得出应称取质量为\(0.001mol/L×1L×372.24g/mol = 0.37224g\) 。
5. **加去离子水溶解并定容**：向容器中加入适量去离子水，搅拌使各成分充分溶解，待完全溶解后，将溶液转移至容量瓶中，用去离子水定容至所需体积，如上述例子中定容至 1L。
6. **调节 pH 值**：使用 pH 计测量溶液 pH 值，并根据需要用冰醋酸或 Tris 碱溶液微调，使缓冲液达到所需 pH 值，一般 Tris 醋酸盐电泳缓冲液的 pH 值在 8.0 - 8.5 左右。

三、注意事项
1. **材料质量**：确保所使用的 Tris 碱、冰醋酸、EDTA - Na₂ 等材料质量合格，避免因杂质影响缓冲液性能。
2. **操作规范**：在称取、量取等操作过程中，严格遵循实验规范，保证量取的准确性。
3. **pH 调节**：pH 值调节时应缓慢操作，避免调节过度，每次调节后需等待 pH 计读数稳定后再进行下一步操作。
4. **储存条件**：配制好的缓冲液应储存于干净的容器中，一般在 4℃冰箱中保存，避免微生物污染及缓冲液成分发生变化。