铵乙酸RNA沉淀法详论
夫欲明铵乙酸RNA沉淀之法,当究其源,析其理,明其用。
自生化之术兴,于核酸之研日益精深。RNA之提取与纯化,乃分子生物学要务之一。铵乙酸RNA沉淀之法,以其独特之优,于诸般手段中占一席之地。
铵乙酸者,具温和之性,于RNA之沉淀,可保其结构之完整,免其受剧烈条件之损。其理在于,铵乙酸解离出之离子,能与RNA周围之水分子相互作用,改变溶液之离子强度与极性,使RNA分子间之相互作用增强,进而从溶液中沉淀析出。
行此沉淀之法,需谨守规程。先,备妥样本,含RNA之液宜纯净,少杂蛋白、多糖之属,以防其扰沉淀之效。次,添适量铵乙酸溶液,视样本之况与RNA之量,精准控其剂量。复以醇类助沉,乙醇或异丙醇皆可,二者可降低RNA之溶解度,促其沉降。继而,低温离心,借离心之力,使沉淀与上清分离,RNA遂富集于管底。
铵乙酸RNA沉淀之法,应用颇广。于基因表达之研,可获纯净RNA,为逆转录、定量PCR等实验供优材;于病毒学,助析病毒RNA之特性;于植物学,可探植物基因之表达调控。
然此法亦非无缺。杂质之存或致沉淀不纯,且操作之时,对温度、试剂比例之控需精细,稍一不慎,便损RNA之质与量。
总而论之,铵乙酸RNA沉淀法,为RNA研究之利器。用之者,当熟稔其理,谨行其法,扬其长而避其短,方可于科研之途,借之达至新境。