Ammonium Acetate DNA Precipitation
醋酸铵DNA沉淀法

夫欲得纯净之DNA,常赖醋酸铵DNA沉淀之法。此法也,精妙非常,可使DNA自复杂之混合体系中析出,获高纯之质。

先备醋酸铵溶液,其量与浓度,皆依样本特性与实验所求而酌定。将含DNA之样本,小心置诸容器,徐徐加入醋酸铵溶液,其间须轻缓搅动,务使二者匀和。醋酸铵者,于溶液中离解出铵离子与醋酸根离子,铵离子可与DNA磷酸骨架上之负电荷相吸,致DNA分子之电荷状态改变,溶解性亦因之而变。

继而,添适量之无水乙醇或异丙醇。醇类之加入,可降低DNA在溶液中之溶解度。因DNA具亲水性,而醇类与水互溶,却疏DNA,此疏水性作用,使DNA分子相互聚集。经此步骤,DNA渐自溶液中析出,呈絮状或沉淀之态,肉眼可见。

待沉淀初现,以离心机速转之。离心机之速,视样本量与离心管之规格而设,通常于适宜转速下,使DNA沉淀紧密聚于管底。倾去上清液,此液含未沉淀之杂质,弃之。留存沉淀,即为欲得之DNA粗品。

然此沉淀或犹含些许杂质,故需以70%乙醇轻洗之。乙醇洗之,可去残留之醋酸铵及其他可溶杂质,而不损DNA。洗毕,再离心,弃上清,待乙醇自然挥发殆尽,DNA沉淀即干燥可用。

用醋酸铵DNA沉淀之法,可有效富集与纯化DNA,为后续分子生物学实验,如PCR、测序、克隆等,提供优质之模板,实乃分子实验之要法也。